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摘要本研究旨在探討基于葉綠體轉(zhuǎn)化的三角褐指藻外源蛋白表達(dá)技術(shù)，通過構(gòu)建葉綠體表達(dá)載體并利用電穿孔法導(dǎo)入外源基因，成功在三角褐指藻中表達(dá)了CAT和GFP蛋白。該技術(shù)具有高效、穩(wěn)定和安全的特點(diǎn)，為生產(chǎn)高附加值產(chǎn)品提供了新的平臺(tái)，具有廣闊的應(yīng)用前景。引言三角褐指藻（Phaeodactylumtricornutum）是一種重要的海洋硅藻，具有培養(yǎng)簡單、成本低廉和不含內(nèi)毒素等優(yōu)點(diǎn)，作為生物反應(yīng)器具有顯著的優(yōu)勢。然而，傳統(tǒng)的核基因轉(zhuǎn)化方法在三角褐指藻中的外源基因表達(dá)效率較低，且存在位置效...

摘要：本研究旨在通過電穿孔轉(zhuǎn)化技術(shù)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入沙眼衣原體（CT），構(gòu)建基于CT的載體系統(tǒng)，并探索其在真核宿主細(xì)胞中的遺傳與表達(dá)。實(shí)驗(yàn)采用2.5kV電壓電擊處理CT和重組質(zhì)粒，結(jié)果顯示外源質(zhì)粒能成功導(dǎo)入CT并隨其遺傳復(fù)制，但未在CT中表達(dá)。本研究為沙眼衣原體載體系統(tǒng)的制備提供了試驗(yàn)依據(jù)和方法模型。引言沙眼衣原體（Chlamydiatrachomatis，CT）作為一種重要的致病菌，廣泛存在于人類泌尿生殖系統(tǒng)中，是引起非淋菌性尿道炎、宮頸炎等多種疾病的主要病原體。近年來，隨著基...

摘要本文詳細(xì)探討了影響電穿孔法轉(zhuǎn)化大腸桿菌的各類因素，包括電場參數(shù)、細(xì)胞狀態(tài)、DNA質(zhì)量等，并通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了最佳轉(zhuǎn)化條件。結(jié)果表明，優(yōu)化電穿孔條件能顯著提高轉(zhuǎn)化效率，為基因工程研究提供了可靠的技術(shù)支持。引言微生物細(xì)胞作為自然界廣泛存在且功能多樣的微小生命體，其細(xì)胞膜天然具備選擇透過性，嚴(yán)格調(diào)控物質(zhì)進(jìn)出，保障細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)并限制外界物質(zhì)侵入。突破這層屏障，精準(zhǔn)、高效調(diào)控細(xì)胞內(nèi)外物質(zhì)交換，挖掘微生物潛能，一直是科研攻堅(jiān)的重點(diǎn)。電穿孔技術(shù)作為一種新興的物理方法，巧妙利用電場脈沖改變細(xì)胞...

摘要本文詳細(xì)闡述了柔嫩艾美耳球蟲ADF重組卡介苗的構(gòu)建及其免疫保護(hù)性研究。通過RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增ADF基因，并克隆至卡介苗表達(dá)載體中，構(gòu)建了重組卡介苗pMV261-ADF和pMV361-ADF。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，重組卡介苗通過滴鼻免疫方式具有顯著的抗球蟲效果，為雞球蟲病的預(yù)防提供了新的策略。引言雞球蟲病是一種由艾美耳屬球蟲寄生在雞的腸道引起的寄生性原蟲病，其中柔嫩艾美耳球蟲（Eimeriatenella）是最主要的病原體之一。該病分布廣泛，感染率高達(dá)60%～70%，死亡率可超過...

摘要：本文介紹了一種新型的高通量小間距細(xì)胞電穿孔裝置，采用電絕緣的聚氯乙烯（PVC）薄膜制作，電極間距為80μm。該裝置不僅顯著降低了細(xì)胞電穿孔所需的電壓，提高了實(shí)驗(yàn)操作的安全性，還實(shí)現(xiàn)了高通量操作，提升了實(shí)驗(yàn)效率。盡管電穿孔轉(zhuǎn)化效率有所降低，但通過進(jìn)一步優(yōu)化實(shí)驗(yàn)參數(shù)，該裝置在基因工程領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。引言細(xì)胞電穿孔技術(shù)，又稱電轉(zhuǎn)染技術(shù)，是一種常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法。該技術(shù)通過施加一定的電場強(qiáng)度可逆地?fù)舸┘?xì)胞膜，在細(xì)胞膜上形成小孔或通路，從而將遺傳物質(zhì)引入細(xì)胞內(nèi)。自1982...

摘要：本文研究了借助電穿孔法將綠色熒光蛋白（GFP）基因?qū)肴毡狙x童蟲的技術(shù)，并驗(yàn)證了其表達(dá)。通過優(yōu)化電穿孔條件，實(shí)現(xiàn)了高效的基因轉(zhuǎn)染，為血吸蟲基因功能研究及潛在的基因治療提供了新途徑。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，導(dǎo)入的GFP基因在血吸蟲童蟲體內(nèi)成功表達(dá)，表現(xiàn)出綠色熒光。引言：血吸蟲病是一種嚴(yán)重危害人類健康的寄生蟲病，主要通過接觸含有血吸蟲尾蚴的疫水傳播。血吸蟲生活史復(fù)雜，包括成蟲、蟲卵、毛蚴、胞蚴、尾蚴和童蟲等多個(gè)階段。血吸蟲病的防治關(guān)鍵在于理解其發(fā)育過程及基因功能。然而，由于血吸蟲...

摘要：本研究利用電穿孔法將水牛脂肪干細(xì)胞（BASC）和成纖維細(xì)胞（BFF）進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染，通過優(yōu)化電穿孔參數(shù)，實(shí)現(xiàn)了高效的基因?qū)?。?shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，電穿孔法對早期代數(shù)細(xì)胞具有較高的轉(zhuǎn)染效率和相對存活率，為水牛相關(guān)基因功能研究和疾病治療提供了有力支持。引言電穿孔法（Electroporation），又稱電轉(zhuǎn)染，是一種利用短暫高電壓脈沖在細(xì)胞膜上形成暫時(shí)孔道，從而實(shí)現(xiàn)外源DNA等大分子物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部的基因轉(zhuǎn)染技術(shù)。通過調(diào)節(jié)電場強(qiáng)度、脈沖時(shí)間和脈沖次數(shù)等參數(shù)，可以將外源DNA導(dǎo)入真核...

摘要：本文詳細(xì)探討了電穿孔技術(shù)在介導(dǎo)小干擾RNA（siRNA）高效轉(zhuǎn)染小鼠胚胎中的應(yīng)用。通過優(yōu)化透明帶弱化程度、電壓、脈沖時(shí)間和脈沖次數(shù)等條件，結(jié)合不同介質(zhì)作為電轉(zhuǎn)緩沖液，實(shí)現(xiàn)了siRNA簡便、高效地轉(zhuǎn)染小鼠附植前胚胎。本研究為基因功能研究提供了有力的技術(shù)參考。引言：近年來，小干擾RNA（siRNA）介導(dǎo)的RNA干擾（RNAi）技術(shù)已成為研究基因功能的重要工具。siRNA通過特異性降解靶mRNA，抑制其表達(dá)，從而實(shí)現(xiàn)基因沉默，為研究基因在生物體發(fā)育和疾病發(fā)生中的作用提供了強(qiáng)有...