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摘要:本文旨在探索優(yōu)化原代大鼠海馬神經元轉染方法,以提高樹突棘形態(tài)學觀察的效果。通過比較Lipofectamine2000和慢病毒轉染方法,發(fā)現(xiàn)Lipofectamine2000在轉染效率和熒光表達上更具優(yōu)勢。在培養(yǎng)12天的神經元中轉染,20天時樹突棘形態(tài)學觀察效果佳。本研究為神經退行性疾病的突觸可塑性機制研究提供了重要手段。引言:樹突棘是腦內興奮性連接的主要位點,在突觸形成及其功能上發(fā)揮著重要作用。樹突棘在數(shù)量和形態(tài)方面的改變會直接影響突觸的功能,進而影響腦功能的改變。因此...
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摘要:本研究旨在構建重組真核表達載體pIRESneo2/mIL-2,并在哺乳類工程細胞C2C12中實現(xiàn)持續(xù)穩(wěn)定表達小鼠白介素2(mIL-2)。通過脂質體轉染法導入重組載體,經Westernblots驗證成功表達mIL-2。本研究為mIL-2的進一步研究和應用提供了重要基礎,具有重要的學術和應用價值。引言:白介素2(IL-2)是一種重要的細胞因子,屬于白介素家族,對免疫系統(tǒng)具有顯著的調節(jié)作用。IL-2能夠刺激和增強T細胞的增殖和活化,促進免疫細胞亞群的分化和功能調節(jié),因此在免疫...
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摘要:本研究旨在通過基因打靶技術,構建牛朊蛋白基因prnp的敲除載體,并轉染牛胎兒成纖維細胞,實現(xiàn)prnp基因的高效敲除。利用正負篩選策略富集中靶細胞,最終獲得了9個陽性細胞克隆。本研究為生產抗瘋牛病的轉基因牛提供了理論基礎和技術支持。引言:朊蛋白(Prionprotein)是動物傳染性海綿狀腦病的致病蛋白,由prnp基因編碼的一種糖蛋白。在牛中,這種病癥被稱為瘋牛?。˙SE),是一種嚴重危害人類健康和世界經濟發(fā)展的傳染性疾病。瘋牛病的病原體是PrPsc,一種內源性膜錨定蛋白...
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摘要:本文探討了聚凝胺(Polybrene)在提升慢病毒轉染樹突狀細胞效率中的作用。通過詳細的實驗設計和實施,發(fā)現(xiàn)聚凝胺能顯著增強病毒顆粒與樹突狀細胞的結合,從而提高轉染效率。本研究為基因功能研究和基因治療提供了新的策略,具有廣闊的應用前景。引言:基因轉染技術在生物醫(yī)學研究中占據(jù)重要地位,尤其在基因功能研究和基因治療領域。慢病毒載體因其高效、穩(wěn)定的特點而被廣泛應用于細胞轉染。然而,樹突狀細胞(DendriticCells,DCs)作為重要的免疫細胞,其轉染效率一直較低,限制了...
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引言內耳疾病,如感音神經性耳聾和梅尼埃病等,嚴重影響患者的生活質量?;蛑委熥鳛橐环N新興的治療手段,在內耳疾病的治療中展現(xiàn)出巨大潛力。然而,內耳結構的復雜性和對損傷的高度敏感性,使得基因遞送成為一大挑戰(zhàn)。慢病毒載體因其高效、持久的基因表達能力,成為內耳基因治療研究的工具。小鼠耳蝸鼓室內注射是常用的內耳基因遞送方法之一,但轉染效率往往受到多種因素的影響。因此,優(yōu)化小鼠耳蝸鼓室內慢病毒轉染技術,提高轉染效率和安全性,對于推動內耳基因治療的發(fā)展具有重要意義。構建慢病毒轉染內耳疾病的...
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引言:SARS(嚴重急性呼吸綜合征)冠狀病毒是一種高傳染性的病原體,自2002年底爆發(fā)以來,對全球公共衛(wèi)生構成了嚴重威脅。SARS-CoV的S蛋白不僅是病毒的主要結構蛋白,還在病毒與宿主細胞表面受體結合及介導膜融合進入細胞的過程中起關鍵性作用。因此,S蛋白成為SARS疫苗研究的主要靶點。裂殖酵母作為一種非常有前景的外源基因表達系統(tǒng),表達的外源蛋白更接近其天然特性,是分子生物學研究中的重要工具。本研究旨在構建SARS-CoVS蛋白在裂殖酵母中的表達體系,為進一步研究新一代SAR...
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引言外源基因導入哺乳動物細胞是基因功能研究、基因治療及細胞工程等領域的關鍵技術。高效、安全的基因轉移方法對于實現(xiàn)外源基因在細胞內的穩(wěn)定表達至關重要。傳統(tǒng)方法如脂質體介導轉染、病毒載體轉導等雖各有優(yōu)勢,但存在細胞毒性大、操作復雜或安全性隱患等問題。電穿孔法作為一種物理轉染技術,通過短暫施加高壓電場使細胞膜形成微小孔洞,允許外源DNA進入細胞,具有操作簡便、適用范圍廣及可大規(guī)模應用等優(yōu)點。然而,電穿孔過程對細胞損傷較大,轉化效率與細胞存活率往往難以平衡,限制了其廣泛應用。構建高效...
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摘要:本文詳細闡述了大豆矮桿導入系的外源片段剖析及基因定位研究,通過繪制圖示基因型方法分析了含有矮桿基因S的片段導入系,共檢測到100個導入片段,確定了多個與矮桿基因密切相關的位點。本研究為進一步研究大豆矮桿基因提供了重要基礎,對大豆育種具有重要意義。引言:大豆(Glycinemax)作為重要的糧油兼用作物,在全球范圍內廣泛種植。大豆種子富含蛋白質和植物油,對人類飲食和健康具有重要作用。然而,傳統(tǒng)大豆品種生長周期長、植株高大,給管理和收割帶來不便。因此,培育矮桿大豆品種成為大...